????微藻培養(yǎng)基是供微藻生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。

????由于微藻具有不同的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類(lèi)很多，使用的原料也各有差異，但從營(yíng)養(yǎng)角度分析，微藻培養(yǎng)基中一般含有微藻所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。

????另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。為了達(dá)到特定要求的研究，需要進(jìn)行培養(yǎng)基配制和滅菌。

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微藻培養(yǎng)基該如何配制與滅菌?

1.配制溶液

??液體培養(yǎng)基：向容器內(nèi)加入所需水量的一部分,按照培養(yǎng)基的配方,稱(chēng)取各種原料,依次加入使其溶解。最后補(bǔ)足所需水分，對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì),需加熱溶解,加熱過(guò)程所蒸發(fā)的水分,應(yīng)在全部原料溶解后加水補(bǔ)足。

????固體培養(yǎng)基：配制時(shí),先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸,再將稱(chēng)好的瓊脂加入,繼續(xù)加熱至完全融化.并不斷攪拌,以免瓊脂糊底燒焦。

2.調(diào)節(jié)pH值

??用pH試紙(或pH電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì))測(cè)試培養(yǎng)基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH進(jìn)行調(diào)節(jié),直到調(diào)節(jié)到配方要求的pH值為止。

3.過(guò)濾

??用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養(yǎng)基過(guò)濾.

??用紗布過(guò)濾時(shí),最好折疊成六層；用濾紙過(guò)濾時(shí),可將濾紙折疊成瓦棱形,鋪在漏斗上過(guò)濾。

4.分裝

??已過(guò)濾的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行分裝.

??斜面培養(yǎng)基：須將培養(yǎng)基分裝于試管中.一般用每只15×150毫米的試管,約裝3～4毫升(1/4～1/3試管高度).

??平板培養(yǎng)基/液體、半固體培養(yǎng)基:則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶?jī)?nèi)。分裝時(shí),一手捏松彈簧夾,使培養(yǎng)基流出,另一只手握住幾支試管或錐形瓶,依次接取培養(yǎng)基。分裝時(shí),注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口,以免浸濕棉塞引起雜菌污染。裝入試管的培養(yǎng)基量,視試管和錐形瓶的大小及需要而定.

??深層培養(yǎng)基:用20×220毫米的試管約裝12～15毫升。每只錐形瓶裝入的培養(yǎng)基,一般以其容積的一半為宜。

5.加棉塞

??分裝完畢后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過(guò)濾空氣,避免污染.棉塞應(yīng)采用普通新鮮、干燥的棉花制作,不要用脫脂棉,以免因脫脂棉吸水使棉塞無(wú)法使用。

??制作棉塞時(shí),要根據(jù)棉塞大小將棉花鋪展成適當(dāng)厚度,揪取手掌心大小一塊,鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中,用右手食指插入棉花中部,同時(shí)左手食指與姆指稍稍緊握,就會(huì)形成1個(gè)長(zhǎng)棒形的棉塞.

??棉塞作成后,應(yīng)迅速塞入管口或瓶口中,棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙,以防空氣中微藻沿皺折侵入。棉塞不要過(guò)緊過(guò)松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi),上端露出少許棉花便于拔取。

??塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札,準(zhǔn)備滅菌。

?6.制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基

?培養(yǎng)滅菌后,如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基,須趁培養(yǎng)基未凝固時(shí)進(jìn)行。

??制作斜面培養(yǎng)基：在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放1支長(zhǎng)0.5～1米左右的木條,厚度為1厘米左右，將試管頭部枕在木條上,使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜,凝固后即成斜面培養(yǎng)基。

??制作平板培養(yǎng)基：將剛剛滅過(guò)菌的盛有培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,點(diǎn)燃酒精燈,右手托起錐形瓶瓶底,左手拔下棉塞,將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,左手打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋,右手迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,每皿約倒入10毫升,以鋪滿(mǎn)皿底為度.鋪放培養(yǎng)基后放置15分鐘左右,待培養(yǎng)基凝固后,再5個(gè)培養(yǎng)皿一疊,倒置,平放于恒溫箱內(nèi),24小時(shí)后檢查,如培養(yǎng)基末出現(xiàn)異常現(xiàn)象，即可用來(lái)培養(yǎng)微藻。

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