萊茵衣藻營養(yǎng)條件的改變對過氧化物酶體含量的影響

茵衣藻是一種模型綠色微藻,能夠利用醋酸異養(yǎng)生長。盡管含有完整的β氧化基因,但不能在脂肪酸上生長。最近的報(bào)道表明,藻類優(yōu)先隔離而不是分解脂酰鏈,來用作快速重建膜。我們收集了一系列過氧化物酶體生物發(fā)生所需的潛在衣藻過氧化物素(PEXs),以表明萊茵衣藻具有一套完整的過氧化物酶體生物發(fā)生因子。為了確定過氧化物酶體參與外源性脂肪酸的代謝,我們檢測了在不同營養(yǎng)條件下表達(dá)與過氧化物酶體蛋白N端或c端肽融合的熒光蛋白,同時加入熒光標(biāo)記的棕櫚酸。在光照和黑暗,有或者沒有乙酸作為碳源的條件下,使用共聚焦顯微鏡跟蹤過氧化物酶體。在細(xì)胞中,鑒定了四個主要的隔間,包括: (1)乙醛酸循環(huán)酶標(biāo)記和含有過氧化物酶體靶向信號1(PTS1)三肽但缺乏脂肪酸標(biāo)記,(2)脂肪酸標(biāo)記,(3)乙醛酸循環(huán)酶標(biāo)記,(4)PTS1標(biāo)記。不到5%的隔間同時含有脂肪酸和過氧化物酶體標(biāo)記物。對光學(xué)切片圖像的統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),萊茵衣藻在細(xì)胞中同時攜帶不同的過氧化物酶體群體,并根據(jù)光照條件調(diào)節(jié)過氧化物酶體的含量。另一方面,無論培養(yǎng)條件如何,同時含有脂肪酸和過氧化物酶體標(biāo)記物的隔室的比例都沒有顯著變化。結(jié)果表明,β-氧化在萊茵衣藻的過氧化物酶體群體中可能發(fā)生率較小,這支持了藻類中脂肪酸的主要代謝偏好是脂質(zhì)生物合成而不是β-氧化的觀點(diǎn)。

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