LED調(diào)光和補(bǔ)氮聯(lián)合策略提高兼養(yǎng)三角褐指藻的巖藻黃素產(chǎn)量

不同光質(zhì)條件下三角褐指藻的兼養(yǎng)培養(yǎng)

轉(zhuǎn)自:微藻技術(shù)與產(chǎn)業(yè)

華南理工大學(xué)在海洋微藻生產(chǎn)巖藻黃素研究方面取得重要突破——LED調(diào)光和補(bǔ)氮聯(lián)合策略提高兼養(yǎng)三角褐指藻的巖藻黃素產(chǎn)量

巖藻黃素(Fucoxanthin)是一種廣泛存在于海洋藻類的類胡蘿卜素,占整個(gè)生物圈中所有類胡蘿卜素含量的10%以上。巖藻黃素具有抗癌、抗肥胖、預(yù)防糖尿病及阿爾茲海默癥等功效,在生物醫(yī)藥和功能食品領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值。目前商業(yè)化巖藻黃素的主要來源是海帶、裙帶菜等大型褐藻,這類原料中巖藻黃素含量極低(僅約為干重的0.01%),提取困難、加工成本高且產(chǎn)物純度低,難以滿足日益增長的市場需求。海洋硅藻三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)生長速度快,可進(jìn)行自養(yǎng)和兼養(yǎng)培養(yǎng),自養(yǎng)下其巖藻黃素含量高達(dá)干重的1%~6%,是大型海藻的上百倍。三角褐指藻來源的巖藻黃素藻油已獲得美國FDA認(rèn)證,作為肝臟脂肪控制的膳食補(bǔ)充劑,是國際市場的新寵。

目前,三角褐指藻的培養(yǎng)主要在自養(yǎng)條件下進(jìn)行,生物量濃度低、培養(yǎng)時(shí)間長,不利于高效生產(chǎn)巖藻黃素。前人研究表明,三角褐指藻在兼養(yǎng)條件下生物量干重可達(dá)3~15 g/L,但類胡蘿卜素含量通常只有干重的0.5%~0.7%。開發(fā)三角褐指藻在兼養(yǎng)條件下快速生長及高效積累巖藻黃素的關(guān)鍵技術(shù)是目前亟待突破的瓶頸。

華南理工大學(xué)魏東教授課題組系統(tǒng)研究了三角褐指藻響應(yīng)不同光質(zhì)與補(bǔ)氮策略的特性,建立了兩階段兼養(yǎng)培養(yǎng)技術(shù),實(shí)現(xiàn)了巖藻黃素在該藻中的高效積累。研究論文“Improving fucoxanthin production in mixotrophic culture of marine diatom Phaeodactylum tricornutum by LED light shift and nitrogen supplementation”近期發(fā)表在國際生物工程期刊Frontiers in Bioengineering and Biotechnology。?

不同光質(zhì)條件下三角褐指藻的兼養(yǎng)培養(yǎng)
圖1 不同光質(zhì)條件下三角褐指藻的兼養(yǎng)培養(yǎng)
該研究先在搖瓶中優(yōu)化了三角褐指藻的兼養(yǎng)培養(yǎng)條件,發(fā)現(xiàn)在較高接種密度(1×107cells/mL)和較低光照強(qiáng)度(20 μmol/m2/s)下,有利于三角褐指藻生物量和巖藻黃素積累。在紅藍(lán)混合光(6:1)和純藍(lán)光照射下,可分別達(dá)到最大生物量濃度(5.53 g/L)和最高巖藻黃素含量(16.28 mg/g)。因此,在第一階段采用紅藍(lán)混合光(6:1)用于促進(jìn)細(xì)胞生長,在第二階段采用加強(qiáng)藍(lán)光及補(bǔ)氮操作,用于促進(jìn)生物量及巖藻黃素積累。通過轉(zhuǎn)換光質(zhì)和補(bǔ)氮的兩步法操作,三角褐指藻在第二階段獲得了最高生物量濃度(6.52 g/L)和巖藻黃素產(chǎn)率(8.22mg/L/d與第一階段相比,每個(gè)細(xì)胞內(nèi)巖藻黃素含量(pg/cell)提升了12%。對(duì)巖藻黃素合成途徑中關(guān)鍵基因的轉(zhuǎn)錄水平的qRT-PCR分析表明,在第二階段中編碼八氫番茄紅素合成酶(PSY)、玉米黃質(zhì)環(huán)氧化酶(ZEP)和巖藻黃素葉綠素復(fù)合蛋白體b FCPb)的基因轉(zhuǎn)錄水平顯著上調(diào),而編碼紫黃素環(huán)氧化酶(VDE)的基因轉(zhuǎn)錄水平顯著下調(diào),結(jié)果顯著提升了巖藻黃素含量。
兩步法兼養(yǎng)培養(yǎng)三角褐指藻的生產(chǎn)性能與巖藻黃素合成途徑中關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控
2 兩步法兼養(yǎng)培養(yǎng)三角褐指藻的生產(chǎn)性能與巖藻黃素合成途徑中關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控
本研究開發(fā)的兩步法培養(yǎng)工藝,巖藻黃素產(chǎn)率是目前報(bào)道的最高水平,為今后利用三角褐指藻規(guī)模光發(fā)酵生產(chǎn)巖藻黃素奠定了新技術(shù)基礎(chǔ)。研究亮點(diǎn):

  1. 高接種密度和低光強(qiáng)培養(yǎng)有利于兼養(yǎng)三角褐指藻生物量及巖藻黃素積累;
  2. 兼養(yǎng)條件下紅藍(lán)混合光(6:1)可以促進(jìn)三角褐指藻生物量的積累;
  3. 兼養(yǎng)條件下藍(lán)光可以顯著提高三角褐指藻胞內(nèi)巖藻黃素的含量;
  4. LED調(diào)光和補(bǔ)氮聯(lián)合策略可以獲得最高巖藻黃素產(chǎn)率8.22 mg/L/d;
  5. 在兩步法兼養(yǎng)培養(yǎng)中巖藻黃素合成關(guān)鍵基因顯著上調(diào)促進(jìn)了巖藻黃素合成。

【論文出處】

RunqingYang, Dong Wei. Improving fucoxanthin production in mixotrophic culture of marine diatom Phaeodactylum tricornutum by LED light shift and nitrogen supplementation. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 2020. doi: 10.3389/fbioe.2020.00820.

【作者】楊潤青(博士生)、魏東(教授)

【魏東教授簡介】

華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院教授、博士生導(dǎo)師。研究方向?yàn)樯镛D(zhuǎn)化和營養(yǎng)工程——面向功能食品、環(huán)境修復(fù)和廢棄物資源化利用的工業(yè)生物技術(shù),主要包括:

1、圍繞工業(yè)生物技術(shù)的核心內(nèi)容,針對(duì)富含生物活性物質(zhì)和高效環(huán)境修復(fù)的微藻(酵母)優(yōu)良種質(zhì),建立“組學(xué)”(Omics)技術(shù)平臺(tái),在轉(zhuǎn)錄組、代謝組(脂組)、細(xì)胞組、藻際微生物組水平上,重點(diǎn)探索營養(yǎng)與環(huán)境因子對(duì)微藻與藻際微生物的作用機(jī)制、微藻光合作用和光發(fā)酵過程中碳氮磷高效生物轉(zhuǎn)化及代謝調(diào)控機(jī)制的基礎(chǔ)科學(xué)問題;

2、在應(yīng)用技術(shù)上,著重開發(fā)微藻與藻際微生物組培養(yǎng)系統(tǒng)、微藻高密度(光)發(fā)酵、微藻戶外大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)及其在生物轉(zhuǎn)化積累植物蛋白、油脂、生物活性物質(zhì)(類胡蘿卜素、胞外多糖、藻膽蛋白)方面的調(diào)控技術(shù),為微藻生物活性物質(zhì)的開發(fā)、環(huán)境修復(fù)、三廢(廢水、廢氣、廢渣)處理與資源化利用、生物餌料和生物飼料配料、生物能源的開發(fā)解決產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)。

已承擔(dān)國家級(jí)、省部級(jí)、市級(jí)科研項(xiàng)目和企業(yè)委托項(xiàng)目30余項(xiàng),發(fā)表論文140余篇、申報(bào)專利24件(授權(quán)10件)。現(xiàn)任中國藻業(yè)協(xié)會(huì)理事、中國海洋與湖沼學(xué)會(huì)海洋生物技術(shù)分會(huì)理事和藻類分會(huì)理事。Energy Conversion and Management (Q1, 2019 IF 8.208)、Critical Reviews in Biotechnology (Q1, 2019 IF 8.108)、BioresourceTechnology (Q1, 2019 IF 7.539)、Journalof CO2?Utilization?(Q1, 2019 IF 6.193)等26個(gè)SCI國際期刊審稿人,澳大利亞阿德萊德大學(xué)博士論文評(píng)審人。教育部全國萬名優(yōu)秀創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)導(dǎo)師人才庫首批入庫導(dǎo)師;華南理工大學(xué)創(chuàng)業(yè)導(dǎo)師;國家人社部認(rèn)證的創(chuàng)業(yè)咨詢師。

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