細(xì)胞核染色劑,甲基綠染液,龍膽紫染液,美藍(lán)(亞甲基藍(lán))染液,硼砂-洋紅染液,德氏(Delafield’s)蘇木精染液,席夫(Schiff’s)試劑配置方法
配方一?甲基綠染液
取1克甲基綠,溶于99毫升蒸餾水中,加入1毫升冰醋酸。本染液能染細(xì)胞核,還用來(lái)染木質(zhì)化細(xì)胞壁。
配方二?龍膽紫染液
取1克龍膽紫,溶于少量2%醋酸溶液中,加2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。
配方三?美藍(lán)(亞甲基藍(lán))染液
取0.5克美藍(lán),溶于30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氫氧化鉀溶液,保存在棕色瓶?jī)?nèi)?。
此溶液能染細(xì)胞核,還用來(lái)染細(xì)菌、血和神經(jīng)組織等。
配方四?硼砂-洋紅染液
取4克硼砂,溶于96毫升蒸餾水中。再加入2克洋紅,加熱溶解后煮沸30分鐘,靜置3日,用100毫升70%酒精沖淡,放置24小時(shí)后過(guò)濾。
此染液能染細(xì)胞核,還用來(lái)染糊粉粒和一般動(dòng)物、植物的整體染色,如水螅、血吸蟲(chóng)等整體標(biāo)本。
配方五?德氏(Delafield’s)蘇木精染液
甲液?取1蘇木精,溶于6毫升無(wú)水酒精中,即成蘇木精-酒精溶液。
乙液?取10克銨礬溶于90毫升蒸餾水中,即成10%銨礬水溶液。
取甲液逐滴加入到乙液中,用紙遮蓋,放在陽(yáng)光明亮處,使它充分氧化。3~4天后將溶液過(guò)濾,在濾液中加入25毫升甘油和25毫升甲醇,保存在密閉玻璃瓶?jī)?nèi)。靜置1~2個(gè)月,待該液顏色變深時(shí)過(guò)濾,可長(zhǎng)久保存。
本染液是染色體的優(yōu)良染色劑,除能染細(xì)胞核外,還用來(lái)染纖維素、細(xì)胞壁和動(dòng)植物組織。
配方六?席夫(Schiff’s)試劑
稱(chēng)取0.5克堿性品紅,加到100毫升煮沸的蒸餾水中,再微微加熱5分鐘,不斷攪拌,使它溶解。在溶液冷卻到50攝氏度時(shí)過(guò)濾,濾液中加入10毫升1N鹽酸。再冷卻到25攝氏度時(shí)加入0.5克偏重亞硫酸鈉(?)或無(wú)水亞硫酸氫鈉(?)。把溶液裝入棕色試劑瓶?jī)?nèi),搖蕩后,塞緊瓶塞,放在黑暗中24小時(shí)。在溶液顏色退到淡黃色時(shí),加入0.5克活性炭,用力搖蕩1分鐘,過(guò)濾后把濾液貯在棕色試劑瓶?jī)?nèi),塞緊瓶塞,濾液應(yīng)該是無(wú)色的。在使用時(shí)勿讓溶液長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中和見(jiàn)光(瓶外用黑紙或暗盒遮光)。如溶液變成紅色,即失去染色能力。
堿性品紅是較強(qiáng)的核染色劑,在孚爾根氏(Feulgen’s)反應(yīng)中作為組織化學(xué)試劑,以檢查DNA。